研究方法

循环肿瘤DNA（ctDNA）是具有高潜力的结直肠癌肝转移预后相关的新生物标志物，这是一种碎片化的肿瘤衍生DNA，通过癌症细胞凋亡、坏死和吞噬作用在血流中释放。导致ctDNA释放的其他机制是细胞外小泡的活性分泌和线粒体DNA摄入。据推测，ctDNA反映了肝脏肿瘤负荷，因此可能是一种预测治疗后最小残留疾病（MRD）的新方法。与癌胚抗原（CEA）相比，ctDNA具有半衰期短的优点，可以提供实时的分子信息来监测治疗反应和检测潜在的复发，因此可以对患者的预后提供有价值的见解。

研究结果

最终，共有11项研究符合纳入本系统综述的条件，其中9项可以使用进行荟萃分析（图1）。

其中6项是前瞻性单中心研究，3项是前瞻的多中心研究，其中2项是更大的随机对照试验的一部分。共纳入745名患者接受CRLM的治疗意向，每项研究的患者人数从20至153人不等。总体研究特征和偏倚风险如表格1所示。

RFS方面，3项研究评估术前ctDNA（+）与ctDNA（-）患者的RFS。与未检测到ctDNA的患者相比，CRLM患者手术前ctDNA存在的合并风险比为1.98（95%CI 1.04–4.36；p=0.10）（图2）。

有6项研究对术后可检测的ctDNA与RFS之间的关系进行定量评估。与未检测到ctDNA的患者相比，CRLM患者手术后ctDNA存在的合并风险比为3.12（95%CI 2.27–4.28；p<0.00001）（图3）。

3项研究评估辅助化疗结束后ctDNA（+）与ctDNA（-）患者的RFS。与未检测到ctDNA的患者相比，CRLM患者化疗结束后ctDNA存在的合并风险比为6.39（95%CI 2.13–19.17；p=0.0009）（图4）。

OS方面，4项研究符合术前样本分析的条件。手术前ctDNA（+）患者与ctDNA（-）患者相比，合并风险比是4.04（95%CI 0.98–16.61；p=0.05），如图5所示。

剔除掉存在明显偏移的临床研究癌后，没有导致额外的发现（HR 2.64，95%CI 0.66–10.51；p=0.17）。手术后ctDNA（+）患者与ctDNA（-）患者相比，生存时间短，合并风险比是5.04（95%CI 2.53–10.04；p=0.0001），如图6所示。

研究讨论

本研究中纳入的研究在基线（任何治疗前）的ctDNA检测率为85-89%，而新辅助治疗后的ctDNA阳性率在33%-98%之间。CRLM切除后，阳性率降至20-65%。尽管范围大多相似，但患者接受了不同的治疗策略，并使用了许多不同的ctDNA检测方法。最近的一项研究显示了新辅助化疗对CRLM患者ctDNA的影响，并揭示了早期ctDNA动态变化可以准确预测新辅助治疗的反应和复发。该研究表明，在一个周期的新辅助治疗后，ctDNA VAF显著下降（p<0.0001），并且ctDNA VAF的早期变化是RFS的独立指标（HR 4.0，95%CI 1.22-13.15）。与Tie等人的结果相反，尽管在新辅助治疗期间ctDNA水平平均下降了41倍，但新辅助化疗期间的ctDNA清除率并没有降低手术后复发的风险。

另一个关键因素是ctDNA采样的时间，这在很大程度上取决检查的结果。ctDNA分析可以用于治疗反应监测，因为它可以作为最小残留疾病的实时标记，并提供治疗效果的指示。术后ctDNA状态可以通过识别一组复发风险增加的患者，帮助CLRM根治性切除后的额外治疗决策。手术后直接进行血浆取样检测ctDNA的主要缺点是由于手术造成的组织损伤导致非癌性cfDNA浓度高。这导致ctDNA稀释，可能影响检测的灵敏度，尤其是在术后早期样本中。尽管Reinert等人表明，ctDNA最早可以在手术后两天检测到，但现在人们一致认为，理想情况下，手术后ctDNA采样的时间应至少在术后2周内进行。此外，在监测过程中，ctDNA已被证明有潜力在临床症状之前检测复发。