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在乙肝筛查中，乙型肝炎病毒表面抗原HBsAg弱阳性结果常引发临床困惑——它可能是早期感染的信号，也可能是实验室误差的产物。

作为免疫专业检验人员，笔者结合我室使用的化学发光分析仪的特性，通过“人机料法环”五维分析法，系统梳理乙型肝炎病毒表面抗原HBsAg弱阳性结果的排查流程，为检验人员提供可复制的解决方案。

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核心问题：操作人员是否严格执行SOP？是否存在疲劳作业或经验不足？

新手操作人员对微弱信号判读的敏感性、对仪器状态细微变化的觉察能力、对复杂样本（如溶血、脂血）的处理经验可能不足，可能影响对灰区样本的精准判断。熟练的检验技师能更敏锐地识别异常信号模式。

样本处理不当：离心不充分导致血清/血浆分离不良，残留细胞成分干扰反应；样本量取不精确（过多或过少）；未按规范进行血清样本灭活处理（部分方法要求）。

结果判读疏忽：对临界值附近的信号值（如Cut-off Index在0.9-1.1之间）未保持足够警惕，未严格遵循复检规则；对仪器报警信息（如试剂余量不足、光路异常）未及时处理。

要求双人核对样本量，确保加样量正常（如我室使用的化学发光免疫分析仪第一次进行乙型肝炎病毒表面抗原检测需保证最少150µL样本）。

在以往的工作中出现过，因操作人员误将洗涤液浓度配制错误，造成清洗不彻底，导致背景值偏高，出现乙型肝炎病毒表面抗原HBsAg弱阳性增多的情况。

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定期组织相关操作人员参加能力评估，重点考核浓度在2-4倍cut-off值之间的弱阳性样本的判读能力。

核心工具：所使用化学发光分析仪的精密度与携带污染风险。

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每日进行“日保养”程序，清洁样品针、试剂针、反应杯/比色杯、加样系统等直接接触标本或试剂的部件。使用配套质控品进行常规检测，验证仪器的重复性和准确性，确保检测结果可靠。

我室所用仪器采用磁微粒分离技术，若前一样本为高值阳性，可能由于加样针或清洗区探针长期使用残留磁微粒可能附着在加样针内壁，污染后续样本。

在高值阳性样本后插入空白样本（去离子水）连续检测，若乙型肝炎病毒表面抗原HBsAg S/CO值持续>0.05，可判定为携带污染。

如果发现是携带污染的原因，首先进行管道去污，拆卸加样针和清洗区探针后浸泡，必要时启用仪器自带的“强清洗程序”（含0.5%次氯酸钠溶液），并缩短高值样本与弱值样本的检测间隔。

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核心风险：试剂批间差异、样本质量。

每批次试剂首次上机，会进行不同批号间比对验证，验证通过。同时进行质控品检测，乙型肝炎病毒表面抗原HBsAg阴、阳性质控均在控，即可投入使用。

配制与使用：复溶或稀释操作不规范、复溶后放置时间过长、不同试剂瓶混用、试剂在机内暴露时间过长。

确保样本无溶血、脂血、纤维蛋白。

核心依据：《乙型肝炎病毒表面抗原测定试剂盒（化学发光微粒子免疫检测法）说明书》。

参考《乙型肝炎病毒表面抗原测定试剂盒（化学发光微粒子免疫检测法）说明书》，应将所有初检反应性的样本复检2次。如果两次复检均为非反应性，那么样本经乙型肝炎病毒表面抗原检测呈非反应性；如果其中一次复检为反应性，根据乙型肝炎病毒表面抗原项目的判断标准，样本经乙型肝炎病毒表面抗原检测呈复检反应性。

本实验室采用“三阶确认法”：

检测窗口期：化学发光法虽灵敏，但在感染极早期（“窗口期”）或恢复后期，病毒抗原/抗体浓度极低，本身就处于方法学的检测下限边缘，易呈弱阳性。

HBsAg突变株识别能力：某些乙肝病毒S基因突变株（如G145R）可能导致HBsAg空间构象改变，与部分试剂盒的单克隆抗体结合能力显著下降，出现HBsAg弱阳性甚至假阴性（需结合抗-HBc和HBV DNA结果判断）。

干扰物质：除前述样本因素外，患者体内的异嗜性抗体、类风湿因子、自身抗体、某些药物（如大剂量生物素干扰基于生物素-亲和素系统的发光试剂）也可能引起非特异性结合，导致假性弱阳性。

结合患者病史动态分析。与临床沟通，了解患者有无疫苗接种史和输血史及有无明确乙肝感染指征。

核心隐患：分区管理、温湿度波动。

严格划分清洁区、半污染区、污染区。

我室所用仪器要求环境温度15-30℃、湿度<80%。科室中，温度湿度均由电子温湿度计进行监控，温湿度符合实验室要求。

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案例背景：7月23日，我室连续出现3例HBsAg弱阳性样本（S/CO值 0.05-0.10），高速离心复检后结果仍然显示弱阳性。

人：确认操作人员无变更，SOP执行无偏差。

机：仪器日保养程序已按要求执行，发现可能存在携带污染，拆卸加样针和清洗区探针浸泡。

料：样本质量合格；试剂与耗材均在效期内，试剂不同批号间比对验证通过，质控品结果在控。

法：初检结果弱阳性，高速离心后复检结果仍为弱阳性，HBV DNA定量结果为阴性。

环：实验室分区布局合理，温湿度记录无异常。

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由于加样针或清洗区探针长期使用，可能有纤维蛋白附着在加样针内壁，导致携带污染。拆卸加样针和清洗区探针浸泡后，在高值阳性样本后插入空白样本（去离子水）连续检测，乙型肝炎病毒表面抗原HBsAg S/CO值均<0.05，问题解决。

乙型肝炎病毒表面抗原HBsAg弱阳性的精准判读，需以“人机料法环”为框架，结合仪器特性与患者临床信息（如疫苗接种史）综合分析。通过标准化流程与动态质控，可使假阳性率降低，为临床提供可靠依据。

【参考文献】