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奥沙利钳诱导人骨髓造血细胞凋亡及DNA损伤修复

2020-06-21作者:王国平主编账号论著
血液肿瘤

作者:邹游,黄丹,李小兰,肖徽,陶德定,胡俊波,龚建平

华中科技大学同济医学院附属同济医院胃肠外科


目的


探讨在细胞毒药物奥沙利钳诱导下,人骨髓CD34+前体造血细胞与CD34-成熟造血细胞发生细胞凋亡及DNA损伤修复信号通路上相关基因表达的情况。


方法


采用免疫磁珠法分选出16例人骨髓单个核细胞中的CD34+及CD34—细胞,并应用流式细胞术检测其纯度。用奥沙利铀(终末浓度为10μg/mL)诱导2种细胞凋亡,检测诱导不同时间的2种细胞凋亡率的差异。提取细胞RNA,并利用基因芯片技术,分析比较药物诱导前后的CD34+及CD34-细胞中DNA损伤修复信号通路相关基因的表达情况。


结果


16份骨髓样本CD34+阳性率为(4.75士L82)%;免疫磁珠法分选后,流式细胞术检测CD34+细胞的纯度为(81.24±5.68)%,所得CD34-细胞的纯度为(97.67±1.21)%0CD34+细胞在经过奥沙利铀诱导后4.8.12h,凋亡率分别为(27.44±4.12)%、(53.58±7.89)%,(84.65士6.20)%,CD34一细胞在诱导后4、8、12h,凋亡率分别为(18.40±3.07)%、(39.11+5.28)%、(71.65±7.73)%,各时间点2种细胞的凋亡率差异均有统计学意义(均PV0.05)。基因芯片结果显示,在加入奥沙利钳诱导前,CD34+细胞与CD34-细胞表达差异2倍以上的基因有9种,其中前者有7种基因表达高于后者,2种基因表达低于后者,在奥沙利钳诱导8h后,CD34+细胞与CD34-细胞表达差异2倍以上的基因有14种,均为前者高于后者。


结论


在奥沙利钳诱导下,骨髓前体CD34+细胞和成熟的CD34-细胞相比,其DNA损伤修复系统相关基因表达水平较高,但更易于发生细胞凋亡。


关键词:CD34;细胞凋亡;DNA损伤;奥沙利舶


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