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2025年10期 | 鸢尾黄素(TEC)对肝癌细胞活力、迁移和凋亡的影响及其机制

2026-02-25作者:临床肝胆病杂志资讯
非原创

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目的

  观察蓝莓单体鸢尾黄素(TEC)对肝癌细胞系HepG2、Huh7细胞的影响,并探讨其作用机制。  

方法

  从蓝莓中提取纯化TEC;利用生物信息学进行靶基因及信号通路筛选;分别采用HepG2、Huh7细胞系,并设置4个TEC浓度处理组(0、30、60和90 μg/mL)进行实验。通过CCK-8法检测细胞活力;划痕实验、Transwell实验评估迁移能力;流式细胞术检测凋亡率;Western Blot检测CCNB1、p53、MDM2、Bax、Bcl-2和active-Caspase 3蛋白表达。构建CCNB1低表达(共5组:NC组、si-NC组、si-NC+TEC组、si-CCNB1组和si-CCNB1+TEC组)和过表达(共4组:OE-NC组、OE-NC+TEC组、OE-CCNB1组和OE-CCNB1+TEC组)细胞模型验证靶点。计量资料多组间比较采用单因素方差分析或双因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。癌组织及癌旁组织间基因表达量的比较采用Wilcoxon符号秩和检验。  

结果

  在HepG2、Huh7细胞中,同一TEC浓度下,TEC干预24 h时细胞存活率显著低于12 h和48 h(P值均<0.05);在干预时间为24 h时,TEC 90 μg/mL浓度组的细胞存活率均显著低于其他浓度组(P值均<0.05)。故采用TEC浓度为90 μg/mL、干预时长为24 h进行后续实验。与TEC 0 μg/mL组相比,30、60、90 μg/mL浓度组细胞的迁移数量及划痕愈合率均显著降低(P值均<0.05);与NC组及si-NC组相比,HepG2和Huh7细胞si-NC+TEC组及si-CCNB1组的迁移细胞数目、划痕愈合率均出现了明显的下降(P值均<0.05)。与NC组及si-NC组相比,HepG2和Huh7细胞si-NC+TEC组、si-CCNB1组的细胞凋亡率均显著上升(P值均<0.05)。在HepG2细胞中,与0 μg/mL组相比,30、60、90 μg/mL浓度组均表现出CCNB1和Bcl-2蛋白表达水平的下调(P值均<0.05),60和90 μg/mL浓度组p53、Bax、active-Caspase 3蛋白表达水平上调(P值均<0.001),同时伴随MDM2蛋白表达的降低(P值均<0.05)。在Huh7细胞中,与0 μg/mL组相比,30、60和90 μg/mL组CCNB1蛋白表达降低(P值均<0.01);60和90 μg/mL浓度组p53和Bax蛋白表达显著上调,MDM2蛋白下调(P值均<0.05);90 μg/mL浓度组Bcl-2蛋白表达下调、active-Caspase 3蛋白表达上调(P值均<0.01)。与si-NC组相比,HepG2和Huh7细胞中si-NC+TEC组及si-CCNB1组CCNB1、MDM2、Bcl-2蛋白的表达水平均显著下调,p53和Bax蛋白的表达水平均显著上调(P值均<0.05)。与OE-NC组相比,HepG2和Huh7细胞OE-NC+TEC组CCNB1、MDM2显著下调,p53蛋白水平上调(P值均<0.05),而OE-CCNB1组的CCNB1和MDM2蛋白表达水平均显著上调,p53蛋白表达水平则显著下调(P值均<0.05);OE-CCNB1组与OE-CCNB1+TEC组间CCNB1、MDM2及p53的蛋白表达水平比较差异均无统计学意义(P值均>0.05)。  

结论

  TEC可在体外抑制HepG2和Huh7细胞增殖、迁移,促进细胞凋亡,其机制可能是通过下调CCNB1表达,激活p53信号通路。

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