第61届欧洲肾脏病协会ERA年会于2024年5月23日至26日在瑞典斯德哥尔摩举行，今年的会议主题是“重新思考肾脏健康和改革肾脏护理（Rethinking Kidney Health and Transforming Kidney Care）”。

本次大会评选出了 TOP 10 研究，中国医学论坛报特邀东部战区总医院刘志红院士团队，对TOP 10 研究进行深入解读。

作者：东部战区总医院 国家肾脏疾病临床研究中心 全军肾脏病研究所 张炯

新月体性肾小球肾炎（CrGN）是肾小球炎症反应中最严重的一种形态学改变。根据肾脏免疫病理将其分为三型：抗肾小球基底膜病抗体型、免疫复合物型和少免疫沉积型。

不论何种病因，CrGN的特征是肾小球壁层上皮细胞（PECs）广泛增殖形成新月体。初期的细胞性新月体主要由于肾小球毛细血管袢局部断裂后，炎症介质和白细胞进入鲍曼囊引起上皮细胞的增殖和巨噬细胞的浸润。破坏性新月体随后逐渐被纤维化所取代，后期以胶原纤维沉积为主者称为纤维性新月体，并最终引起肾脏纤维化。

目前CrGN的治疗方法，包括糖皮质激素和细胞毒类药物并不直接靶向针对肾小球固有细胞。紧密连接蛋白claudin-1（CLDN1）是一种参与上皮紧密连接的跨膜蛋白，可以暴露在紧密连接之外，在肾小球PECs中高表达，可介导肾脏促纤维化途径和肾小球细胞外基质（ECM）重塑。

既往研究发现，Lixudebart（即ALE.F02）是第一个针对CLDN1的单克隆抗体，能特异性靶向和阻断损伤上皮细胞中CLDN1的表达。目前，在一项进行中的抗中性粒细胞胞质抗体相关性血管炎（AAV）合并急进性肾小球肾炎临床试验（RENAL-F02, NCT06047171）中发现，CLDN1高表达于PECs。因此，来自法国的研究团队Delbet等人，于今年ERA-EDTA大会报道，探讨了CLDN1在CrGN中的功能作用，以及在CrGN中靶向CLDN1的潜在益处。

本研究采用肾脏双重免疫荧光染色和空间转录组学分析CLDN1在CrGN患者肾组织中的表达。研究CLDN1表达与临床终点（eGFR、蛋白尿）、疾病生物标志物和新月体演变的相关性。利用CLDN1表达阳性新月体肾小球构建了空间分辨的分子通路。另外，研究还使用抗CLDN1单抗在CrGN的临床前模型中进行了概念验证研究。

研究结果显示，首先，在本队列150例血管炎（AAV）和IgAN患者的肾活检样本中，经肾组织免疫荧光分析，细胞性新月体和纤维性新月体中CLDN1表达上调。肾小球中CLDN1表达与纤维连接蛋白面积相关，且伴随足细胞的丢失（足细胞标志蛋白P57染色缺失）。

其次，在中位随访时间分别为2.5年和3.7年的AAV和IgAN患者中，活化PECs表面CLDN1和CD44的双重表达程度与肾脏不良预后（即eGFR< 30 ml/min）事件相关。空间转录组学分析则强调，新月体表达CLDN1阳性率与肾小球中ECM基因之间存在关联。

最后，本研究不仅局限于临床队列的临床和组织病理分析，还进行了动物实验研究。在肾毒血清诱导的CrGN小鼠模型中，抗CLDN1单抗治疗减少了蛋白尿，改善了肾功能并降低了纤维化生物标志物（collagen IV）的表达。

至此，本研究结果提示了CLDN1在CrGN发病机制中的功能作用，为抗CLDN1抗体作为CrGN患者的一种新的治疗方法提供了临床前概念验证。

肾小球壁层上皮细胞（PECs）在新月体肾炎中的相关研究，可以追溯到2009年以来一系列具有重要科学意义的发现。来自美国的Shankland教授和荷兰的Moeller教授，先后从抗GBM肾炎动物模型（Shankland SJ, AJP-RP 2009）和模式动物细胞示踪研究（Moeller MJ, JASN 2009）证实了肾小球新月体病变中细胞的主要成分是PECs（表达CD44）。结合近年来，分子靶向药物的研究进展，在新月体肾炎疾病中，探索性开发、试验针对PECs的分子靶向药物治疗具有理论依据和现实意义。

紧密连接claudin蛋白与黏附连接和桥粒一起形成细胞膜片的骨架。紧密连接蛋白控制着细胞旁离子通量；此外，它们还在维持细胞极性和信号转导中发挥关键作用(Tsukita S, JCB 2000; Van Itallie CM, AJP-RP, 2006)。

Claudin蛋白是一个有着至少29个密切相关的跨膜蛋白的家族，其中大多数在基因组和蛋白质组水平上已经被明确分析和研究。此类蛋白存在于多种正常组织，以及炎症反应增生组织和良恶性肿瘤组织中。紧密连接蛋白存在于细胞膜最顶端的侧面。一个细胞可以表达一种、两种或多种类型的紧密连接蛋白。Claudin蛋白参与细胞与细胞之间的信号转导、组织结构稳定和细胞外基质的产生。因此，在新月体肾炎中，主要由PECs组成的新月体病变结构，claudin蛋白的表达不仅可以作为反应组织形态学特征的标志物，同时也是一个潜在的治疗靶点。

既往研究中，有关紧密连接蛋白claudin在肿瘤细胞和组织中的作用被阐述的较为清楚（Meoli L, Nat Rev Nephrol 2023），近年来的研究发现， claudin家族沿着肾单位的顺序表达反映了离子通道和转运蛋白的顺序表达。过去二十年，紧密连接蛋白claudin的调节和失调在胃肠道和肿瘤疾病中得到了广泛的研究。在肾脏中，对claudin表达改变的原因和影响的更深入理解才刚刚出现。因此，研究claudin在维持电解质和水稳态中的作用之外，探索其对于肾脏炎症性病变的治疗和肾脏转归结局的影响，促进claudin作为肾脏疾病预后标志物或药物靶点的研究具有重要意义。

ALE.F02是hIgG1 Fc-Silent mAb，可选择性结合暴露的CLDN1。本研究结果提示，CLDN1在CrGN的发病机制中发挥作用，为抗CLDN1治疗CGN提供了临床前概念验证。因此，在本年度ERA-EDTA公布摘要结果的同时，结合一项使用抗CLDN1单抗Lixudebart治疗AAV快速进展性肾小球肾炎的临床研究，我们期待该临床研究结果的进一步发布，能够使CrGN的治疗迈入分子靶向药物治疗时代。

作者介绍

张炯

• 东部战区总医院、国家肾脏疾病临床医学研究中心干部病区主任，医学博士，副教授，硕士研究生导师，美国华盛顿大学访问学者。

• 江苏省康复医学会肾脏病专委会副主任委员；江苏省医师协会肾脏内科医师分会委员；南京医学会肾脏病学分会委员。《临床肾脏病杂志》编委。

• 以第一作者及通讯作者发表SCI文十余篇，参编中文专著3部，主持国家级课题2项。2017年获华夏医学科技奖（三等奖）。享受军队优秀专业技术人才岗位津贴（三类）。

• 主要研究方向：肾脏功能影像研究、肾脏疾病的分子靶向治疗研究。