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问:诊断结核病实验室检查的临床意义,比如T- SPOT、结核分枝杆菌特异性抗体、PPD试验应当如何来解读?如何提高结核病的诊断水平?
王仲元教授:
结核病的诊断主要包括病原学的诊断和病理学的诊断。提高结核病的诊断水平需要从这两方面下功夫。
首先,病原学的诊断。
结核分枝杆菌涂片检查是确诊肺结核最特异的方法。涂片抗酸染色镜检快速简便,在我国,由于非结核分枝杆菌感染尚属少数,抗酸杆菌阳性则肺结核诊断即基本成立。
结核分枝杆菌的培养仍然是结核菌检测和药敏试验的“金标准”。传统的罗氏培养法耗时较长,约4~6周。液体培养系统,例如BACTEC和MGIT提供了较传统固体培养更为敏感和快速的方法,1~3周即可检测到分枝杆菌的生长。
结核菌素试验阳性反应提示存在对结核分枝杆菌的细胞免疫反应,表示存在结核感染的可能性大;强阳性反应提示活动性结核病可能;阴性反应特别是较高浓度试验仍阴性,则一般可排除结核病。目前尚不能凭借结核菌素试验来区别活动性结核病与潜伏性结核感染,免疫缺陷患者中结核菌素纯蛋白衍生物(PPD)试验可能会因细胞免疫功能受损而呈假阴性。
近年来发展的以T细胞为基础的γ-干扰素释放试验(IGRA),成为新一代的检测结核感染的免疫学诊断技术,T- SPOT是其中的一种。IGRA可以区分结核分枝杆菌自然感染与卡介苗接种和大部分非结核分枝杆菌感染,因此诊断结核感染的特异性明显高于PPD试验。目前的IGRA仍无法区分活动性结核病和潜伏性结核感染,无法预测潜伏性结核感染转变为活动性结核病的风险。
结核感染的血清学诊断方法即检测结核的特异性抗体,已经有很长的历史。但总体来说,现有血清学检测方法的差异性较大,敏感性较低,因此不推荐其独立应用于结核病的诊断,不过,血清学诊断方法由于操作简便易行,可用于结核病的诊断。
分子生物学检测技术——聚合酶链反应(PCR)技术可以将标本中微量的结核菌DNA在体外大幅扩增。但由于DNA提取过程遭遇污染等技术原因,可能出现假阳性,而且PCR无法区分活菌和死菌,故不能用于结核菌治疗效果评估、流行病学调查等。其中全自动封闭操作的半巢式实时荧光定量PCR技术(Xpert MTB/RIF)可以检测标本是否含有结核分枝杆菌以及利福平是否耐药,全程约2小时,并具有良好的生物安全性和操作简便性。
其次,病理学的诊断。
病理学诊断需要取得组织标本。获取标本的方法很多,例如肺穿刺活体检查术,利用支气管镜进行刷检或活检。对标本进行病理组织切片及抗酸染色,观察病理切片是否有干酪样坏死及结核性肉芽肿等结核病特有的病理改变。
充分利用现有的诊断技术,对结核病和其他呼吸道传染性疾病进行有效的诊断和鉴别诊断,这是提高结核病诊断水平的重要途径。
指导专家: 深圳市第三人民医院肺病医学中心王仲元教授
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