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microRNA-223-3p靶向微管相关蛋白1B抑制肝星状细胞活化的机制研究

2024-01-17作者:临床肝胆病杂志资讯
非原创

 

目的

  探讨microRNA-223-3p (miR-223-3p)对肝星状细胞活化的影响及机制。  

方法

  选取人肝星状细胞系LX2细胞为研究对象,采用TGF-β刺激LX2细胞的方式构建肝星状细胞活化模型,通过实时荧光定量PCR检测miR-223-3p在肝星状细胞活化过程中表达水平变化;转染miR-223-3p mimic至LX2细胞,通过实时荧光定量PCR、蛋白免疫印迹法(Western Blot)及细胞免疫荧光明确miR-223-3p对肝星状细胞活化的调控作用;通过双荧光素酶报告基因实验验证miR-223-3p与靶基因MAP1B的关系;转染MAP1B的siRNA至LX2细胞,通过Western Blot明确抑制MAP1B表达对肝星状细胞活化的影响;转染miR-223-3p至LX2细胞,通过实时荧光定量PCR和Western Blot验证miR-223-3p对MAP1B的调控作用。计量资料两组间比较采用成组t检验。  

结果

  与静息状态相比,肝星状细胞处于活化状态时,miR-223-3p表达水平下降(t=9.12,P<0.001)。过表达miR-223-3p能抑制肝星状细胞活化标志物平滑肌肌动蛋白及Ⅰ型胶原的mRNA(t值分别为8.35、12.23,P值均<0.01)和蛋白(t值分别为16.24、20.90,P值均<0.001)表达水平。双荧光素酶报告基因实验证实MAP1B是miR-223-3p的潜在靶基因。与对照组相比,过表达miR-223-3p的LX2上MAP1B的mRNA表达(t=5.95,P<0.01)及蛋白表达(t=11.12,P<0.001)水平均显著降低。  

结论

  miR-223-3p可通过靶向MAP1B抑制肝星状细胞活化。



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谢文涛, 鱼康康, 程琦, 等. microRNA-223-3p靶向微管相关蛋白 1B抑制肝星状细胞活化的机制研究[J]. 临床肝胆病杂志,2023, 39(12): 2845-2850. DOI:  10.3969/j.issn.1001-5256.2023.12.015.
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